尺寸排阻色譜柱是一種基于分子尺寸差異進行分離的高效色譜柱。基于多孔性凝膠作為固定相，利用分子在凝膠孔道中的排阻效應進行分離。在色譜柱中，大分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻，較早地流出色譜柱；中等體積的分子部分滲透；小分子則能夠完q滲透入凝膠孔道內，最后流出色譜柱。因此，樣品分子基本按其分子大小先后流出，從而達到分離的目的。

　　尺寸排阻色譜柱的使用技巧：

　　1、色譜柱的選擇與準備

　　選擇正確的色譜柱：根據待測樣品的性質和分子量范圍選擇合適的色譜柱。例如，對于分子量較大的樣品，應選擇具有較大排阻極限的柱子。

　　色譜柱的儲存與維護：在不使用時應將色譜柱存放在適當的有機溶劑中，如甲醇或乙醇，以防止微生物生長和色譜柱干裂。

　　2、樣品的準備

　　樣品溶解性：確保樣品完q溶解在流動相中，避免樣品在柱上沉淀或聚集。

　　過濾與脫氣：樣品溶液應通過0.22微米或更小的濾膜過濾，并徹d脫氣，以防止氣泡影響色譜分析。

　　3、流動相的選擇與優化

　　流動相組成：選擇與樣品化學性質兼容的流動相，常用的流動相包括水、鹽溶液或有機溶劑等。

　　流動相流速：調整適宜的流速，通常流速的增加可以縮短分析時間，但過高的流速可能引起柱效降低。

　　4、系統的溫度控制

　　恒定溫度：保持色譜系統在恒定的溫度下運行，溫度波動可能會影響色譜峰的形狀和分離度。

　　5、檢測器的正確設置

　　選擇合適的檢測器：常用的檢測器有折射率檢測器和紫外吸收檢測器。選擇時應考慮樣品的化學性質和檢測靈敏度需求。

　　檢測器靈敏度：適當調節檢測器的靈敏度，以獲得清晰可辨的色譜峰而不至于過載。

　　6、數據分析與處理

　　校準曲線的建立：使用一組已知分子量的標樣來建立校準曲線，這對于準確測定未知樣品的分子量至關重要。

　　數據處理軟件：利用專業的數據處理軟件進行數據收集和分析，可以有效提高數據處理的準確性和效率。