苯基疏水色譜柱是一種基于苯基基團修飾的填料實現樣品分離的色譜柱，廣泛應用于生物大分子（如蛋白質、多肽）及芳香族化合物的分離分析。其核心原理在于苯基基團通過化學鍵合固定在硅膠或其他基質上，形成穩定的疏水層，利用疏水作用及π-π電子相互作用實現分離。

　　其分離效果依賴于鹽濃度調控。高鹽環境下，樣品疏水區域暴露，與填料結合緊密；鹽濃度降低時，疏水作用減弱，樣品逐漸洗脫。此外，苯環與芳香族化合物之間可形成π-π相互作用，為含芳香環的化合物提供獨t的選擇性，尤其適用于分析帶有吸電子基團的芳香化合物。

　　苯基疏水色譜柱在安裝前的細節操作：

　　1、柱接頭匹配與安裝方向

　　確認色譜柱接頭類型與儀器接口一致（如標準不銹鋼接頭、PEEK手緊接頭），若不匹配，需使用適配的轉接頭（避免強行安裝導致接頭損壞）。

　　注意色譜柱流向：柱身上標注有“IN”（入口）和“OUT”（出口），安裝時需與儀器流路方向一致（入口接泵/進樣器，出口接檢測器），反向安裝會導致柱效下降。

　　2、排除氣泡與平衡柱床

　　卸下色譜柱兩端的堵頭，立即將入口端連接到儀器管路（避免空氣進入柱床），出口端先不接檢測器，用低流速（如0.1-0.2mL/min）泵入保存溶劑或初始流動相，緩慢排出柱內氣泡（觀察出口端流出液，直至無氣泡連續排出）。

　　連接出口端到檢測器，逐步提高流速至實驗流速（如1mL/min），用初始流動相平衡色譜柱（通常平衡10-20柱體積，直至基線穩定），確保固定相充分溶脹并達到平衡狀態。

　　3、避免干柱與劇烈沖擊

　　色譜柱安裝前需保持濕潤，嚴禁長時間暴露在空氣中導致固定相干涸（若不慎干涸，需用低濃度有機溶劑緩慢沖洗，不可直接用高流速流動相沖擊）。

　　安裝過程中輕拿輕放，避免劇烈振動或撞擊柱體，防止固定相塌陷或填充不均。